应用酶联免疫吸附试验检测男女不育（孕）患者血清和精液中抗精子抗体（附324例实验报告）

在引起不育的各种病因中，免疫原因引起的不育占较大的比例，其中又以抗精子免疫导致的不育最为常见，据黄宇烽等研究报告，在141名不育患者中血清抗精子抗体（ASAb），高达31.9%，精浆中高达44%。
ASAb检测的经典方法有凝集试验、制动试验以及免疫荧光技术。我们在精液常规分析的基础上，应用了酶联免疫吸附技术（ELISA）对324名男性不育症患者及50对不育夫妇的血清IgG型ASAb和IgM型ASAb进行了测定。现将结果报告如下：

材料和方法

为1991年4月-1992年5月，在我院男性病门诊和住院患者，不育时间1-8年，平均3年，年龄23~42岁，平均29岁，对其中50例患者的配偶做了血清ASAb测定。

二、材料

血清：采集空腹外周静脉血2ml，分离血清，-30℃冰箱贮存待检。
精浆：受检对象禁欲3天在后，手淫采集精液，37℃液化30’，离心取上清，即刻使用或-30℃保存待检。
精子抗原：健康已婚男性机关报鲜供精（密度50~120×106/ml，活动率＞60%，活力2-3级，正常形态＞60%，无凝集）。
酶标抗体：HRP-抗人M链（均购自第四军医大学HRP-羊抗人IgG分子病毒室）工作浓度1：2000

三、测定方法

精液常规分析：参考WHO手册进行。
ELISA法：参照周曾娣法进行，结合本室条件加以改进。

结果与讨论

一、324名不育男性精液检查结果

分类	精液正常	少精	无精	死精	不液化	性障	合计
人数	141	36	21	48	42	36	324
%	43.5%	11%	6.5%	15%	13%	11%	100%

表2 各类不育患者ASAb检测结果

分类	不明原因	少精	无精	死精	不液化	性障
总人数	141	36	21	48	42	36
AsAb阳性精	42	2	0	8	6	24
%	29.7%	5.5%	0%	16.6%	14.0%	11.0%

从上述两表中可以看出，324名不育患者中约有一半的人精液分析结果正常（47.8%），这些人通常在临床上诊断为原因不明的不育症。通过血清和精液ASAb检测发现。这部分患者中的ASAb阳性率（29.7%），明显高于任何一类精液分析结果异常的患者，（P＜0.01）。进一步证实了在精液分析正常的不育患者中，至少有1/3的患者不育的病因与免疫学因素有关。因为数字是一种屏蔽性抗原，正常情况抗体不会产生ASAb均为阴性，而少精症患者也明显低于其他各组。表明ASAb产生及其抗体滴度（资料未列）与精液中的精子数量似有一定的相关性。而与精子状态关系不大。

二、AsAb种类及检出率

表（3）为52名男性AsAb阳性患者血清和精液中AsAb的检出率：

在52名精液分析正常，而AsAb阳性患者的血清或精液中均可检测到AsAb，阳性率分别为21.1%和25.0%、二者间为阳性的占53.9%，在血清精液中均可检出IgG、IgM类AsAb，血清中二者无显著性差别，而精液中则以IgG类为主，根据Ig类抗体产生的规律，做AsAb类型检测对于区分新近感染和继往感染有一定的意义。
三、50对夫妇ASAb检测结果：

表4 为检出的AsAb种类

在50对不育夫妇中，男性ASAb阳性率为28%，女性为32%，男女两方ASAb均阳性无明显差异者共10名占总人数的20%，明显高于男方或女方一方为阳性者，表明夫妇双方ASAb产生有一定的相关性。

小结

本文报告了用酶联免疫吸附试验对324名男性不育患者和50对不孕夫妇血清和精液中的ASAb进行检测的结果。

1、324名男性患者中，精液分析正常者为47.80%，而这部分患者的ASAb阳性率明显高于其他精液分析异常的患者（阳性率29.7%），表明免疫原因是造成男性不育的重要因素。

2、52名ASAb阳性患者的血清和精液的Ab检出率间无明显差异、阳性率分别为21。0%和25。0%，二者均阳性的占53.9%，精液中ASAb以IgG类为主。血清中ASAb类无显著差别。

3、对50例不育夫妇的ASAb检测结果表明、夫妇二者间ASAb的阳性率有显著的相关性，夫妇两人ASAb同为阳性的人明显高于男方或女方一方面的患者。